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核酸提取方法、純化及相關(guān)應(yīng)用場景
發(fā)布日期: 2023/5/22 11:19:25

核酸是由許多核酸聚合成的生物大分子化合物,為生命的最基本物質(zhì)之一。核酸廣泛存在所有動物、植物細胞、微生物內(nèi)、生物體內(nèi)核酸常與蛋白質(zhì)結(jié)合形成核蛋白。不同的核酸, 化學(xué)組成、核酸排列順序不同。根據(jù)化學(xué)組成不同,分為 RNA 和DNA。

DNA是儲存、復(fù)制和傳遞遺傳信息的主要物質(zhì)基礎(chǔ), RNA 在蛋白質(zhì)合成過程中起著重要作用,其中轉(zhuǎn)運核糖核酸,簡稱 tRNA, 起著攜帶和轉(zhuǎn)移活化氨基酸的作用:mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板;核糖體的核糖核酸,簡稱rRNA, 是細胞合成蛋白質(zhì)的主要場所。

核酸提取樣品

普通樣品:血液、動植物組織、細菌、細胞、病毒、 髓、體液等等。

疑難樣品:唾液、痰液、土壤、糞便、頭發(fā)、石蠟包埋組織、骨骼、 牙齒、指甲、煙頭等等

核酸提取的方法

核酸包括DNA 、RNA兩種分子,在細胞中都是以與蛋白質(zhì)結(jié)合的狀態(tài)存在,核酸提取的主要步驟為:裂解細胞去除與核酸結(jié)合的蛋白質(zhì)以及多糖、脂類等生物大分子,去除 其他不需要的核酸分子,如提取DNA分子時應(yīng)去除 RNA,反之亦然。沉淀核酸純化核酸,去除鹽類,有機劑等雜質(zhì)。

【磁珠法】

一般用于自動化提取,生物磁珠是一種新型的功能化固體載體,其表面包被有活性基團,可以與多種生物活性物質(zhì)發(fā)生偶聯(lián),兼具有液體的流動性和固體磁性材料等特點,在外磁場的作用下可以定向移動和栠中,當撤去外磁場后,稍加振蕩或抽吸又可均勻分散于液體中,從而使固液相的分離變的十分快捷方便,通過簡單的洗脫可以得到純度很高的靶向物質(zhì)。

核酸提取儀應(yīng)用領(lǐng)域

廣泛應(yīng)用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業(yè)和分子生物學(xué)研究等多種領(lǐng)域。幾乎在每個實驗室,與生物分子相關(guān)的分離純化工作都是十分重要,且必不可少的。

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