食用菌母種培養(yǎng)基的滅菌方法
在食用菌母種培養(yǎng)基制作中常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法,該法滅菌較為徹底,具體方法步驟及注意事項(xiàng)請(qǐng)看下文:
①選鍋、加水
選用手提式高壓蒸汽滅菌鍋,向滅菌鍋內(nèi)加水至水位標(biāo)記高度。注意:水不可過多也不可過少,過少易燒干,過多棉塞易受潮,引起雜菌污染。
②裝入培養(yǎng)基
把培養(yǎng)基有序豎直排放入滅菌鍋內(nèi),留開通氣孔,并保證蒸汽流通。試管口和棉塞不能直接接觸鍋壁,上面要蓋2層報(bào)紙或1層防水油紙,防止鍋蓋下面的冷凝水打濕棉塞。
最后均勻擰緊鍋蓋上的螺絲,防止漏氣。
③加熱滅菌
將裝入培養(yǎng)基的滅菌鍋放置在2-3千瓦的電爐上進(jìn)行加熱,當(dāng)壓力升至0.05兆帕?xí)r,打開放氣閥緩慢放氣,讓壓力降至零,再放氣10-15分鐘,當(dāng)有大量熱蒸汽排出時(shí),關(guān)閉放氣閥升壓滅菌。
當(dāng)壓力升至0.11-0.12兆帕?xí)r,開始計(jì)時(shí),并調(diào)節(jié)火力大小,始終維持所需壓力30分鐘。
④停止加熱,緩慢減壓
在0.11-0.12兆帕壓力下.滅菌30分鐘后,停止加溫,待壓力自然下降到0時(shí)打開放氣閥,緩慢排出殘留蒸汽;然后打開鍋蓋,待熱蒸汽冷卻片刻后,取出滅菌物品。
滅菌完后,若連續(xù)使用,應(yīng)注意補(bǔ)足水分后再用。若暫時(shí)不用,應(yīng)排出鍋內(nèi)剩余水分,清理干凈,下次備用。
食用菌接種場(chǎng)所的消毒方法
首先,將接種箱、接種室或者接種帳的衛(wèi)生打掃干凈;然后放入所有用具及母種培養(yǎng)基,用甲醛和高錳酸鉀熏蒸消毒。藥品用量為每立方米甲醛10毫升,高錳酸鉀5克。
熏蒸后的接種箱、接種室或者接種帳還可用紫外線輔助殺菌,一般10立方米的空間,用30瓦的紫外線燈照射30分鐘,待臭氧散去,即可開始接種。
若采用超凈工作臺(tái)接種,首先要將超凈工作臺(tái)用清潔的水和干凈的抹布擦洗干凈,然后再用75%的酒精擦拭,放入接種用具和母種培養(yǎng)基,開機(jī)吹無菌風(fēng)30分鐘。
食用菌菌種消毒后的培養(yǎng)
通過加溫、通風(fēng)、灑水、遮光等方法,保持培養(yǎng)室(箱)溫度20℃-24℃;空氣相對(duì)濕度在60%左右;暗光;空氣新鮮,促使菌絲健壯生長(zhǎng)。經(jīng)2-3天,即可在接種塊上萌發(fā)出大量菌絲,經(jīng)7-10天即可長(zhǎng)滿培養(yǎng)基斜面。
在培養(yǎng)期間每隔2-3天檢查一次菌絲生長(zhǎng)情況,若發(fā)現(xiàn)有雜菌污染或生長(zhǎng)不正常的試管,立即挑出并淘汰。
長(zhǎng)滿的菌種可用于進(jìn)一步擴(kuò)繁,若暫時(shí)不用可放置在20℃-40℃的冰箱中冷藏備用。
山東博科-高壓蒸汽滅菌鍋
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